低温保存是一种在超低温下保存植物材料的方法。低温保存过程包括以下连续的步骤，必须为每个物种定义:材料的选择，预处理，冷冻，储存，解冻，后处理。
材料的选择
- 作为一般规则，材料将选择尽可能年轻和分生。事实上，这种材料中的细胞是最能抵御冰冻的。这种材料可以从体内或体外植物中取样。体外材料通常更可取，因为外植体已经小型化，没有表面污染，也可能没有病原体。材料的生理阶段非常重要。对于石竹分生组织，存活率随着其在茎轴上的等级逐渐降低，从末梢分生组织开始
预处理
- 预处理是指将材料在准备冷冻过程的条件下培养一段时间(几分钟到几天)。它使用各种低温保护物质，如蔗糖、山梨醇、甘露醇、二甲亚砜、聚乙二醇，它们之间的分子量和结构差异很大。
冻结
- 可以进行不同类型的冷冻过程:超快速、快速或慢速冷冻。在后一种情况下，将需要一个可编程的冻结设备，以获得精确和可重复的冻结条件。
存储
- 如果样品永久保存在液氮温度或接近液氮温度，则最大存储时间理论上是无限的。
解冻
- 在大多数情况下，通过将含有样品的冷冻管浸泡在温度约为40°c的水浴中来快速进行解冻，目的是避免在解冻过程中形成的冰微晶的融合。
后处理
- 后处理包括在确保其在最佳可能条件下的最佳恢复的条件下培养材料。低温保护物质通过漂洗、稀释或扩散逐渐消除，因为如果与材料接触太久，它们是有毒的。
可行性评估
- 在许多情况下，再生是非常缓慢的。唯一确定的生存能力评估是解冻后的再生。然而，尽快了解材料在冷冻后是否还活着是非常重要的。为了测量材料的生存能力，有两种主要的测试方法，它们可以在解冻后非常迅速地应用。这些测试是:
- -FDA(二乙酸荧光素):FDA被活细胞吸收并转化为荧光素，荧光素在紫外线照射下产生荧光。这种测试是定量的，因为荧光细胞的百分比可以计算。
- - TTC(2,3,5 -三苯四唑氯化铵):TTC在活细胞的线粒体中通过呼吸作用被还原为甲马甲，呈红色。这个测试是定量的细胞悬浮液，但只有定性的大组织和器官。
- 生存能力测试的主要缺点是它们具有破坏性。此外，FDA的测试在估计存活率方面非常精确，但没有提供细胞增殖能力的信息。
- 非破坏性的方法来估计材料的生存能力，如色谱分析挥发性烃生产(乙烯，乙烷)通过冷冻保存的组织。
